人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)
細胞介紹
該細胞是由Nilsson K實驗室于1974年從一名37歲的患有惡性組織細胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分離建立的。1979年來的研究顯示該細胞在人混合淋巴細胞培養(yǎng)物上清、佛波酯、VitD3、z-IFN、TNF和維A酸的誘導(dǎo)下可以向終末單核細胞分化。該細胞不合成免疫球蛋白，EBV陰性；可產(chǎn)生溶菌酶、（3-2-微球蛋白，受PMA刺激后可產(chǎn)生TNF-ct;表達C3R;可作轉(zhuǎn)染宿主；表達Fas，對TNF和抗Fas的抗體敏感。
 
細胞特性
1)來源：淋巴瘤
2)形態(tài)：單核細胞，懸浮生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運輸和保存：
使用T25瓶充液發(fā)送活細胞。收到細胞后，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態(tài)，并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過夜后，再次檢查細胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，可按照以下細胞培養(yǎng)步驟進行細胞后續(xù)處理操作。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物，請及時與我們?nèi)〉秒娐?lián)。
細胞用途：僅供使用。
 
人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八,
D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：
將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?br />細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
 
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO
后進行凍存。
 
人組織細胞淋巴瘤細胞(U937)注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。